Pesquisa de sarcocystisspp. e neospora caninum em tecidos reprodutivos de gatos domésticos asselvajados na ilha Furtada, Mangaratiba, Estado do Rio de Janeiro.

Abstract

Sarcocystis spp. e Neospora caninum são protozoários intracelulares obrigatórios pertencentes à família Sarcocystidae. Possuem um ciclo heteroxeno, necessitam de dois hospedeiros para completar o ciclo. A fase sexuada ocorre no hospedeiro definitivo e a fase assexuada no hospedeiro intermediário, infectando uma grande variedade de espécies animais. Ambos os agentes são formadores de cistos teciduais na musculatura do hospedeiro intermediário. A epidemiologia desses coccídios em gatos é pouco conhecida e há escassez de estudos na literatura brasileira. Desse modo, o principal objetivo foi pesquisar protozoários Sarcocystis spp. e N. caninum em tecidos reprodutivos de gatos asselvajados por meio do diagnóstico histopatológico e molecular. Amostras foram cedidas pelo Setor de Anatomia Patológica (SAP) da UFRRJ, onde foi feito o processamento e diagnóstico histopatológico. Por se tratar de amostras cedidas, a Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA) sob o protocolo de número 6422250523/2023 (ID 002533) tornou a submissão invalidada, não tendo necessidade de aprovação, pois a proposta está fora do escopo da legislação pertinente. Todos os tecidos reprodutivos foram oriundos de gatos castrados da Ilha Furtada, conhecida popularmente como Ilha dos Gatos, localizada no município de Mangaratiba, Costa Verde do Rio de Janeiro. O levantamento de dados foi realizado por meio do arquivo do SAP para obter informações como sexo, raça e estágio de vida. Para o diagnóstico histopatológico 54 amostras de órgãos reprodutivos conservados em formol a 10%, dentre eles ovários, tubas uterinas, placentas e testículos foram clivados, em dimensões longitudinais de 3 mm por 25 mm, e os cornos uterinos foram submetidos a cortes transversais de 3 mm. Os fragmentos foram inseridos em cassetes histológicos e conservados em álcool anidro. As lâminas foram processadas e confeccionadas com os corantes Hematoxilina e Eosina (HE), em seguida foram analisadas por microscopia óptica, nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Nas lâminas analisadas nenhum cisto foi visualizado, com isso os tecidos foram considerados histologicamente negativos, além disso não foram encontradas alterações microscópicas. Para o diagnóstico molecular foram cedidas 63 amostras de tecidos reprodutivos congelados que foram submetidas a análise no Laboratório de Doenças Parasitárias / Cultivo de células e hemoparasitos da UFRRJ. Foi feita triagem para o gene que reconhece a enzima GAPDH (Proteína Gliceraldeído-3-Fosfato Desidrogenase) a fim de verificar a efetividade da extração de DNA. Foram usados iniciadores específicos para os genes COI direto e reverso de Sarcocystisspp. e Nc5 de N. caninum. O DNA de ambos os protozoários não foi detectado em nenhuma amostra analisada por diagnóstico molecular. Esse foi o primeiro estudo a utilizar tecidos reprodutivos para diagnóstico de Sarcocystis spp. e N. caninum e o primeiro a ser realizado com os gatos asselvajados da Ilha Furtada. Com base nos resultados obtidos nesta pesquisa, pode-se concluir que a população de gatos incluídas neste estudo não apresenta os protozoários em seus órgãos reprodutivos e é possível evidenciar que ambos agentes não demonstram predileção por esses órgãos e não costumam parasitar esses tecidos.